单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于表面抗原外来物种特喜欢的人、寡核苷酸修饰语费用昂扬或实操工艺流程复杂性。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯先生组织在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个高产出低、跨种群、全的平台兼容的全新解决方案。

期刊论文详细资料

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由全国现代专业合理院基因基因与健康成长生态学工程学论述所和全国现代基因基因学着举办的国际上学术研究界论文论文杂志学术期刊，倾力于新闻报道我的生命专业合理和医学检验基因基因学论述方向的爱新颖性论述效果。JGG 2028年度后果指数公式7.1，Scopus学术研究界论文论文杂志学术期刊品评指标图CiteScore 9.9，名列JCR 2028年度GENETICS & HEREDITY论述方向Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY论述方向Q1区，名列全国现代专业合理院论文论文杂志学术期刊设计布局生态学工程学学科门类1区(Top论文论文杂志学术期刊)，基因基因学和生化模式与分子结构生态学工程学小类双1区。

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啥子是HEATag

比较巧妙的“二合为一体”设汁

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组成部分的整合球蛋白

「确定器」控制器 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化修饰语（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「连入器」接口 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）检索条型码开展共价联系。

“1+1>2”的成果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行子样本标注与可追溯。

Fig1: HEATag重量标示的原理提醒图

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操作考察

HEATag终究有大多能打？

能在有差异先决条件下，做到辅乳期部分动物血神经元系单血神经元混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。学习管理团队为 HEATag 如何设置了多轮 “负担公测”，从体细胞系系到体细胞系核，从恒温到较低温度，从新鲜范本到确定范本，全方向核验它的比较稳判定和安全性。

一是轮自测采取喂乳植物人体组织系系：深入分折员工挑选了来于人、鼠、仓鼠五个种群的六种人体组织系（HEK293T、K562、MEF、CHO），在制冷下要 HEATag 箭头后混合型喂养测序。最后回收利用的 11447 个人体组织系中，85.66% 都能根据 HEATag 长商品条码准确性输入到原种群，样例间交叉重合感染稀少，UMAP 聚类分折分折不仅立即证明书，HEATag 长商品条码与种群特情人DNA组的特点特别不符。 紧接着，检查前提更加一个脚印升阶：实验性人数体验在 4℃下箭头新的组织内部膜、在在常温下箭头甲醇特定组织内部膜，还可箭头组织内部膜核。最后显示依旧会闪亮：所有前提下，范例标注与鱼类内容均具备有很棒的重要性性，转换准确无误率超 95%。也许甲醇特定会产生轻度的转录本交错影响，组织内部膜核分离纯化就会大量 RNA 损失，组织内部膜型的批注最后显示依旧会与新的范例增加不一样，声明书 HEATag 可箭头有差异 清理前提下的实验性范例。

Fig2: HEATag 可在差异情况下完成任务单组织转录组混样分享

才能标出喂乳哺乳生物和海洋能无脊椎骨哺乳生物的原代细胞膜

如何说癌生殖细胞系检查是 “基础知识题”，那组织安排样例可是 “额外增加题”， 这样例恰恰舞因癌生殖细胞款式繁杂、自然环境满足性专项 ，变成 记号技能的 “瓶颈问题”，而 HEATag 恰恰舞在这 “瓶颈问题” 上体现了胜机。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸组织安排，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞并不是能被精准的分辩，那些主要的上皮细胞类型、的聚类算法成果都清淅可辨。

更令人惊喜的是HEATag对浮游生物体生物体的支持性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 条型码与植物物种转录组具备有较高完全统一性，无经常出现因高盐大环境导至的 “标记符号生效”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可改变喂奶昆虫组织性样板几吨 scRNA-seq 深入分析

Fig4: HEATag可控制最新鲜海洋能无脊椎骨植物多沉 scRNA-seq 数据分析

HEATag与癌细胞的综合没因起转录组的显著性变换

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在顺利完成标上责任的另外，会对后继的转录成分析引起串扰，能保证了探究动态数据的真性。

Fig5: HEATag没有印象样表的 RNA 展示方法

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在回首过往

HEATag 能为单细胞膜研发带动什么东西？

HEATag 的价值观，远不停于 “解決符号现象”，它的灵活多变性和普遍性，已经为单组织细胞科研访问一些也许性

从使用不一样去看

HEATag 能铺盖从 “简单化非常解析”（如癌组识机构与常见组识机构、药物治疗处置与较）到 “大人数设计”（如组识机构癌内部图谱绘图、高通芯片量诉求）的全比率诉求。时间推移 PIP-seq、Stereo-cell 等新型的可的发展技术设备的的发展，HEATag 还能进一大步加强单癌内部设计的通量，推动科研工作的团队落实更多人数的楼盘。

从跨领域行业有潜力方面看

HEATag 既实用到转录组学，还能与表观人类基因组学、血清质组学、房间组学等系统相结合，也会通过环保定制家具指数和寡核苷酸字段，HEATag 也会轻松自在渗透区别的组学步骤流程，不干扰无线信号采集深入。一并，基本概念HEATag还也会发展方向单细胞系糖组学设计系统。

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配合新动态

拜谱生物技术与陈凯专家取得过程合作共赢意想

最该注意的是，在 HEATag 能力体流露出巨形用潜能的原型下，拜谱大海菌物工程建筑已与我国南方海底科学性与工程建筑广东省进行验室（南京）陈凯院士确定第一次战略合作意项。夫妻双方筹划围绕着 HEATag 能力的高新产业的发展半空、科学管理有效的转化等方面呈现宽度共建，持续推进某种低的成本、跨外来物种的单人体神经上皮细胞符号能力迅速用于真正科学管理场合，为更高进行验室供应高质量、资金的单人体神经上皮细胞的研究产品，推助科学管理操做者在人体神经上皮细胞大海菌物工程建筑学、海底大海菌物工程建筑学、疾患逻辑等邻域得到更高超越